D3 vitamini tedavisi alan kişilerde Klotho geni protein aktivitesinin (fibroblast büyüme faktörü 23, kalsiyum ve fosfat düzeyleri ile) miRNA 22 üzerine etkisinin araştırılması

Klotho geni proteini, miRNA 22, FGF23, kalsiyum ve fosfat; hücresel sinyalizasyon, mineral metabolizması ve kemik sağlığı üzerinde etkili önemli biyolojik parametrelerdir. Bu çalışmada, D vitamini tedavisinin klotho geni protein aktivitesi ile miRNA 22, fibroblast büyüme faktörü 23 (FGF-23), Ca ve PO₄ düzeyleri üzerindeki etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya D vitamini eksikliği tanısı konulan 10 hasta (tedavi öncesi ve tedavi sonrası dönemleri) ve 20 sağlıklı kontrol birey dahil edilmiştir. Tedavi grubundaki hastalardan, tedavi öncesinde ve tedavinin 3. ayında kan örnekleri alınarak analiz edilmiştir. Klotho geni protein aktivitesi ve miRNA 22 seviyeleri qRT-PCR yöntemiyle ölçülmüştür. Serum Ca ve PO₄ düzeyleri fotometrik yöntemle, D vitamini elektrokemilüminesans yöntemiyle, fibroblast büyüme faktörü 23 (FGF-23) ise enzim bağlantılı immünosorbent testi (ELISA) yöntemiyle analiz edilmiştir. D vitamini eksikliği tanısı konulan hastalara, damla formunda D₃ vitamini preparatı verilmiştir. İlk 8 hafta boyunca haftada 50.000 IU yükleme dozu uygulanmış, ardından 6 hafta boyunca günde 1.500 IU idame dozuna geçilmiştir. Çalışmada kontrol grubuna ait klotho geni protein aktivitesi (1,04±0,31) ile tedavi öncesi grup (0,80±0,21) karşılaştırıldığında, kontrol grubunda anlamlı derecede yüksek bulunmuştur (p=0,021). Tedavi sonrası dönemde ise klotho geni protein aktivitesi (1,09±0,19), tedavi öncesi döneme kıyasla istatistiksel olarak anlamlı düzeyde artmıştır (p<0,05). Benzer şekilde, tedavi sonrası grup kontrol grubuyla (1,73±1,67) karşılaştırıldığında da anlamlı bir artış gözlenmiştir (p<0,05). H-FGF-23 serum düzeyleri, tedavi sonrası grupta (104,35±80,34) tedavi öncesi gruba (144,55±77,85) göre anlamlı şekilde azalmıştır (p<0,001). Kontrol grubu (343,18±476,9) ile karşılaştırıldığında da tedavi sonrası grubun H-FGF-23 düzeyinde anlamlı azalma gözlenmiştir (p<0,05). Serum PO₄ düzeyi de kontrol grubunda (3,62±0,32) tedavi öncesi gruba (3,19±0,56) göre anlamlı olarak yüksek bulunmuş (p<0,05), ayrıca tedavi sonrası dönemde PO₄ düzeyi (3,57±0,59) tedavi öncesi döneme göre anlamlı olarak yükselmiştir (p<0,001). Sonuç olarak, D vitamininin klotho geni protein aktivitesini, miRNA 22 ekspresyonunu, serum Ca ve PO₄ düzeylerini artırdığı, FGF-23 seviyelerini ise azalttığı belirlenmiştir. Bu parametrelerin D vitamini tedavisiyle normal değerlere ulaşma mekanizmalarının ve aralarındaki etkileşimlerin daha iyi anlaşılması için ileri düzey çalışmalara ihtiyaç vardır. Elde edilen bulgular, bu parametrelerin D vitamini ile birlikte hastaların klinik değerlendirmesinde biyobelirteç olarak kullanılabilmesi için bir öneri niteliği taşımaktadır.

Klotho gene protein, miRNA 22, FGF-23, calcium, and phosphate are important biological parameters that significantly influence cellular signaling, mineral metabolism, and bone health. This study aimed to investigate the effects of vitamin D treatment on klotho gene protein activity, miRNA 22, fibroblast growth factor 23 (FGF 23), calcium, and phosphate levels. The study included 10 patients diagnosed with vitamin D deficiency (pre-treatment and post-treatment periods) and 20 healthy control individuals. Blood samples were collected from the treatment group before treatment and at the 3rd month of treatment for analysis. Klotho gene protein activity and miRNA 22 levels were measured using the qRT-PCR method. Serum calcium and phosphate levels were analyzed using photometric methods, vitamin D levels were measured by electrochemiluminescence, and fibroblast growth factor 23 (FGF 23) was analyzed using the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method. Patients diagnosed with vitamin D deficiency were administered vitamin D₃ preparation in drop form. A loading dose of 50,000 IU was applied weekly for the first 8 weeks, followed by a maintenance dose of 1,500 IU per day for 6 weeks. In the study, the klotho gene protein activity in the control group (1.04 ± 0.31) was found to be significantly higher compared to the pre-treatment group (0.80 ± 0.21) (p = 0.021). In the post-treatment period, klotho gene protein activity (1.09 ± 0.19) significantly increased compared to the pre-treatment period (p<0.001). When examining miRNA 22 expression levels, a significant increase was detected in the post-treatment group (3.07 ± 1.49) compared to the pre-treatment group (1.15 ± 0.72) (p<0.05). Similarly, a significant increase was observed in the post-treatment group compared to the control group (1.73 ± 1.67) (p<0.05). Serum levels of H FGF-23 significantly decreased in the post-treatment group (104.35 ± 80.34) compared to the pre-treatment group (144.55 ± 77.85) (p<0.001). When compared to the control group (343.18 ± 476.9), a significant decrease in H FGF-23 levels was also observed in the post-treatment group (p <0.05). Serum calcium levels significantly increased in the post-treatment period (9.79 ± 0.31) compared to the pre-treatment period (9.44 ± 0.33) (p <0.05). Serum phosphate levels were also found to be significantly higher in the control group (3.62 ± 0.32) compared to the pre-treatment group (3.19 ± 0.56) (p <0.05), and phosphate levels in the post-treatment period (3.57 ± 0.59) significantly increased compared to the pre-treatment period (p <0.001). In conclusion, it was determined that vitamin D increases klotho gene protein activity, miRNA 22 expression, serum calcium, and phosphate levels, while decreasing FGF-23 levels. Further studies are needed to better understand the mechanisms of normalization of these parameters and the interactions among them with vitamin D treatment. The findings suggest that these parameters could serve as biomarkers in the clinical evaluation of patients alongside vitamin D.